Der mittlere TVO-Abschnitt wird sich über eine Länge von ca. 7,2 km zwischen der Spindlersfelder Straße im Süden bis zur Märkischen Allee (B 158) im Norden erstrecken:
• Die geplante Trasse wird demnach südlich der Querung der Rudolf-Rühl-Allee am Gelände verlaufen, diese und die nachfolgende Bahntrasse östlich des Bahnhofs Wuhlheide überqueren, die Köpenicker Straße kreuzen und sich danach dem Berliner Außenring (BAR) der Deutschen Bahn annähern.
• Bei Bau-km 4+840 wird sie den BAR zum ersten Mal unterqueren, bis Bau-km 6+530 westlich des BAR verlaufen und diesen dann ein zweites Mal unterqueren, um anschließend wieder zur Märkischen Allee einzuschwenken.
• Bei Bau-km 6+900 wird die TVO die Straße Alt-Biesdorf (B 1/B 5) kreuzen und danach an die Märkische Allee anbinden.
